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激光共聚焦顯微鏡的重要參數介紹

返回列表 來源:本站 發(fā)布日期:2024-08-09 09:15:16【

激光共聚焦顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscope, LSCM)是一種高分辨率、高靈敏度的顯微鏡,廣泛應用于生物醫(yī)學研究、材料科學等領域。其重要參數包括但不限于以下幾個方面:

一、光學系統

數值孔徑(NA):

數值孔徑是物鏡和聚光鏡的重要參數,直接影響分辨率和成像質量。高數值孔徑的物鏡能夠收集更多的光線,提高分辨率。

顯微共聚焦系統.jpg

光學校正:

激光共聚焦顯微鏡常采用無限遠校正光學系統,確保成像質量。物鏡齊焦距離需符合國際標準,如≤45mm。

透射光照明:

使用超長壽命LED作為透射光光源,具有光強管理功能,能在切換不同物鏡時保持光強不變。

二、激光器與熒光光源

激光器類型與功率:

激光器是激光共聚焦顯微鏡的核心部件,常用波長包括405nm、488nm、561nm、638nm等。激光器功率需適中,以避免光毒性和樣品損傷,同時保證足夠的熒光激發(fā)效率。

例如,固態(tài)激光器405nm的功率可能≤30mW,488nm、561nm等波長的激光器也有相應的功率限制。

熒光光源:

配備電動控制光閘和電動光亮度調節(jié)功能的熒光光源,至少120W,壽命可達2000小時以上,保證均勻的熒光照明。

三、掃描模塊

掃描器與顯微鏡一體化設計:

掃描器與顯微鏡的一體化設計減少了光路損失,提高了成像質量。

掃描模式:

支持多種掃描模式,包括點掃描、線掃描、區(qū)域掃描、光譜波長掃描等。能夠實現X、Y、Z、T、λ(光譜波長)、I(光強度)、A(區(qū)域)等多維組合掃描。

掃描速度與分辨率:

高分辨率掃描模式下,XY軸分辨率可達≤120nm,XZ軸分辨率可達≤200nm。掃描速度可根據需要調節(jié),如512×512分辨率下可達≥10幀/秒,512×16分辨率下可達≥131幀/秒。

四、檢測器與物鏡

檢測器類型與數量:

配備多個熒光檢測器(≥3個)和透射光檢測器(≥1個),熒光檢測器全部為光譜型檢測器,檢測范圍調節(jié)精度≤1nm。

物鏡系列:

提供多種倍數的物鏡,如5X、10X、20X、40X、63X、100X等,滿足不同觀測需求。高NA值、高透光率的大孔徑物鏡能夠顯著提高成像質量。

五、軟件與工作站

軟件功能:

軟件需具備智能化光路設置、自動預掃描、自動聚焦、多維獲取圖像、Z軸深度補償、交互式漂白等功能。

支持樣品發(fā)射熒光掃描涵蓋410~850nm光譜掃描,具備高分辨多色同時成像能力。

工作站配置:

工作站需具備高性能的硬件配置,如多核主頻不低于3.0GHz的處理器、64GB內存、16GGDDR6顯存等,以確保流暢的圖像處理和數據分析。

六、其他參數

電動控制部件:

顯微鏡配有大屏幕彩色觸摸屏可記憶控制操作,可電動控制光源、物鏡轉盤、XYZ調焦、熒光激發(fā)塊、聚光鏡等部件。

防震臺與溫控系統:

配備系統專用防震臺,確保成像穩(wěn)定性??蛇x配活細胞培養(yǎng)系統,實現溫度、CO2濃度及濕度的精確控制。

綜上所述,激光共聚焦顯微鏡的重要參數涉及光學系統、激光器與熒光光源、掃描模塊、檢測器與物鏡、軟件與工作站等多個方面。這些參數的優(yōu)化與合理配置對于提高成像質量、滿足科研需求具有重要意義。