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超分辨顯微鏡樣品清潔方法詳解

返回列表 來(lái)源:本站 發(fā)布日期:2025-03-26 14:06:03【

超分辨顯微鏡(如STED、STORM等)對(duì)樣品清潔度要求極高,任何微小雜質(zhì)都可能干擾熒光信號(hào)或破壞納米級(jí)分辨率。以下是針對(duì)超分辨顯微鏡樣品的清潔流程及注意事項(xiàng):

一、清潔步驟

初步清潔

去除浮塵:使用高壓氣罐(如SUNTO展途精密儀器清潔罐)或軟毛刷(如Datyson鏡頭刷)輕吹樣品表面,避免直接接觸。

干燥處理:若樣品含水分,用吸水紙(如化學(xué)生物實(shí)驗(yàn)濾紙)輕輕吸干,或使用氮?dú)鈽尨蹈伞?/span>

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深度清潔(針對(duì)頑固污漬)

選擇清潔劑:使用光學(xué)級(jí)異丙醇(與蒸餾水按1:1混合)或?qū)S苗R頭清洗液(如克拉瑪爾品牌)。

擦拭方法:用脫脂棉簽蘸取少量清潔劑,沿單一方向輕輕擦拭樣品表面,避免來(lái)回摩擦。

清洗與干燥

沖洗樣品:用去離子水沖洗樣品,確保無(wú)清潔劑殘留。

徹底干燥:用干燥器干燥樣品,或使用氮?dú)鈽尨蹈?,避免水分殘留?/span>

二、清潔工具與試劑

工具:

高壓氣罐:用于吹去樣品表面浮塵。

軟毛刷:清除樣品表面灰塵,避免劃傷。

脫脂棉簽:配合清潔劑使用,擦拭頑固污漬。

擦鏡紙:用于擦拭樣品表面,確保無(wú)纖維殘留。

試劑:

光學(xué)級(jí)異丙醇:與蒸餾水混合使用,清潔效果好且不損傷樣品。

專用鏡頭清洗液:適用于高精度光學(xué)元件,無(wú)腐蝕性。

三、注意事項(xiàng)

防止損傷:

避免使用硬質(zhì)工具(如金屬鑷子)或粗糙布料,以防劃傷樣品表面。

擦拭時(shí)力度輕柔,避免對(duì)樣品結(jié)構(gòu)造成破壞。

化學(xué)試劑選擇:

禁用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或腐蝕性溶劑(如濃硫酸、氫氧化鈉),防止樣品結(jié)構(gòu)破壞或熒光標(biāo)記失效。

使用清潔劑前,先在樣品邊緣測(cè)試,確保無(wú)不良反應(yīng)。

干燥處理:

清潔后需徹底干燥樣品,防止殘留水分影響顯微鏡真空環(huán)境或?qū)е聢D像模糊。

對(duì)于含熒光標(biāo)記的樣品,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在強(qiáng)光下,防止光漂白。

四、不同材質(zhì)樣品的清潔方法

生物樣品(含熒光標(biāo)記):

優(yōu)先使用壓縮空氣或軟毛刷清潔,避免液體接觸導(dǎo)致標(biāo)記脫落。

若需液體清潔,使用緩沖液(如PBS)沖洗后,立即用氮?dú)獯蹈伞?/span>

金屬/半導(dǎo)體樣品:

可用異丙醇擦拭,去除油污后吹干。

避免使用有機(jī)溶劑(如丙酮)浸泡,以防材料腐蝕。

高分子材料:

避免有機(jī)溶劑浸泡,以防材料膨脹或變形。

使用去離子水沖洗后,用干燥器干燥。

五、清潔后的處理

真空環(huán)境適應(yīng):

對(duì)于需要真空條件的超分辨顯微鏡(如某些STED系統(tǒng)),清潔后需將樣品靜置于真空艙內(nèi)穩(wěn)定,避免氣體吸附干擾成像。

熒光標(biāo)記保護(hù):

若樣品含熒光染料,清潔后需避光保存,防止光漂白。

使用前檢查熒光標(biāo)記穩(wěn)定性,確保成像質(zhì)量。

六、特殊場(chǎng)景處理

細(xì)胞樣品固定:

使用緩沖液(如PBS)清洗細(xì)胞樣品后,采用多聚甲醛固定,維持細(xì)胞形態(tài)。

固定后需用PBS沖洗多次,去除殘留固定劑。

納米結(jié)構(gòu)樣品:

清潔后需通過(guò)原子力顯微鏡(AFM)驗(yàn)證表面粗糙度,確保符合超分辨成像要求。

避免使用可能引入污染的清潔工具或試劑。

通過(guò)遵循上述清潔步驟和注意事項(xiàng),可以確保超分辨顯微鏡樣品表面潔凈無(wú)損,提高成像質(zhì)量和分辨率。

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